猴骨形态发生蛋白受体2型,BMPR2,ELISA试剂盒 - 仪器交易网

来自 : 发布时间：2024-05-14

240){this.width=240;}\" onmouseout=\"HAlbum();\" id=\"DIMG\"> 18906011628 陈先生(先生) （来电时请说是从仪器交易网看到我的) 慧嘉生物您实验身边的好伙伴为客户提供zui高品质的产品和优质的服务AssayBiotech CUSABIO Immunoway Santa Abcam Cst jackson P 厦门慧嘉生物科技有限公司，是一家专业代理国内外知名品牌生命科学试剂产品，产品范围涉及细胞生物学，分子生物学，免疫学及生物化学等实验室科学研究试剂，包括细胞系，细胞培养，ELISA和免疫组化抗体，一抗，二抗，单克隆和多克隆抗体，PCR及放免试剂盒，生化试剂以及各类实验仪器。 公司成立以来，一群有志的年轻人本着始终拥有的创业激情，注重跟踪世界范围分子生物学、细胞生物学等生物学科的发展前沿，努力将欧美专业生产厂家的具有国际先进水平的产品推荐给各类研究人员。已被广泛应用于生命科学基础研究、开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域。客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。 公司在重视产品质量的同时，也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门的全方位的服务体系，努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户。 我们热诚希望与广大用户朋友携手合作，为推动中国的科技发展尽上一份绵薄之力! ※ 公司经营宗旨: 诚信是金、信用第一，努力成为国内外生命科学和生物技术行业的信用企业。 ※ 公司使命: 为生命科研工作者和人类健康提供优质的产品和服务，成为您实验身边的好伙伴。 ※ 价值观: 忠诚、敢为、勤奋、成功 为客户提供 zui高品质的产品 和 优质的服务 AssayBiotech CUSABIO Immunoway Santa Abcam Cst jackson Pierce Sigma Amresco Qiagen Cayman abnova millipore invitrogen merk ebioscience prospec LifeSpan BD 欢迎广大客户咨询，另有大量宣传海报和小礼品赠送。网站：www.biohj.com Q Q：38260375： 0 猴骨形态发生蛋白受体2型(BMPR2)ELISA试剂盒本试剂盒仅供研究使用 检测范围：欢迎QQ或或邮箱sale@biohj.com索取原版说明书zui低检测限：欢迎QQ或或邮箱索取原版说明书特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的，且与其他相关蛋白无交叉反应。有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。说明 1．试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)。2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板(Assay plate )：一块(96孔)。2. 标准品(Standard)：2瓶(冻干品)。3. 样品稀释液(Sample Diluent)：1 20ml/瓶。4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent)：1 10ml/瓶。5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent)：1 10ml/瓶。6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody)：1 120 l/瓶(1：100)7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：1 120 l/瓶(1：100)8. 底物溶液(TMB Substrate)：1 10ml/瓶。9. 浓洗涤液(Wash Buffer)：1 20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。10. 终止液(Stop Solution)：1 10ml/瓶(2N H2SO4)。 需要而未提供的试剂和器材1. 标准规格酶标仪2. 高速离心机3. 电热恒温培养箱4. 干净的试管和Eppendof管5. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，用多通道移液器6. 蒸馏水，容量瓶等标本的采集及保存 1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8 C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则：首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。后计算浓度时，稀释了 N 倍，标本的浓度应再乘以 N 。标准品的稀释原则：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为300 pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制150 pg/ml标准品：取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则：临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100 l)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10 l生物素标记抗体加990 l生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则：临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100 l)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10 l辣根过氧化物酶标记亲和素加990 l辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100 l，余孔分别加标准品或待测样品100 l，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100 l(取1 l生物素标记抗体加99 l生物素标记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制)，37℃,60分钟。3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350 l/每孔，甩干。4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100 l，37℃，60分钟。5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350 l/每孔，甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90 l，37℃避光显色(30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止)。

7. 依序每孔加终止溶液50 l，终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

注：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

洗板方法手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

计算

以标准物的浓度为横坐标(对数坐标)，OD值为纵坐标(普通坐标)，在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。

2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。

3. 一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。

5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。

7. 底物请避光保存。

8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。

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